大鼠elisa試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。將抗大鼠IL-4單克隆抗體包被在酶標板上；分別加入梯度稀釋的標準品和預(yù)稀釋的樣本，標準品和樣本中的大鼠IL-4會與酶標板上的包被抗體充分結(jié)合；洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4抗體，該抗體會與板子上包被抗體捕獲的標準品和樣本中的大鼠IL-4發(fā)生特異性結(jié)合；洗板后加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的鏈霉親和素，生物素與鏈霉親和素會發(fā)生高強度的非共價結(jié)合；洗板后加入顯色劑底物TMB，若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的大鼠IL-4，則HRP會使無色TMB變成不同深淺（正相關(guān)）的藍色物質(zhì)，加入終止液后反應(yīng)孔會變成黃色；在2max=450nm（OD=450nm）處測定反應(yīng)孔樣品吸光度（OD），樣本中的大鼠IL-4濃度與OD成正比，通過繪制標準曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計算出樣本中大鼠IL-4的濃度。

　　大鼠elisa試劑盒注意事項：

　　1.試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。

　　2.試劑盒未使用時應(yīng)保存在2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標準品，請丟棄。

　　3.試劑盒使用前請在室溫恢復(fù)30min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。

　　4.在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。

　　5.為避免交叉污染，請在試驗中使用1次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。

　　6.濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10S即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。

　　7.除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。

　　8.為保證結(jié)果準確，每次檢測均需做標準曲線。